如何選擇適合自己研究的多肽純度？
多肽的純度與多肽的凈含量
多肽的純度是指HPLC方法在214nm處檢測到的目標(biāo)多肽的含量(214nm是肽鏈的吸收波長)，紫外分光光度計(jì)檢測不到水和殘留的鹽份
多肽含量則是指樣品中肽類物質(zhì)相對于非肽類物質(zhì)所占的百分比。通常一條多肽產(chǎn)品中除了多肽本身還包括生產(chǎn)過程中帶入的非鹽組份，如水，被吸收的溶劑、配位離子和鹽等。
引起多肽的不穩(wěn)定的原因
脫酰胺反應(yīng)：在脫酰反應(yīng)中，Asn/Gln 殘基水解形成Asp/Glu。
氧化多肽溶液易氧化的主要原因有兩種，一是溶液中有過氧化物的污染，二是多肽的自發(fā)氧化。在所有的氨基酸殘基中，Met、Cys和His、Trp、Tyr等*易氧化。
水解：多肽中的肽鍵易水解斷裂。由Asp參與形成的肽鍵比其它肽鍵更易斷裂，尤其是Asp-Pro和Asp-Gly 肽鍵。
形成錯(cuò)誤的二硫鍵：二硫鍵之間或二硫鍵與巰基之間發(fā)生交換可形成錯(cuò)誤的二硫鍵，導(dǎo)致三級結(jié)構(gòu)改變和活性喪失。
旋：除Gly外，所有氨基酸殘基的α碳原子都是手性的，易在堿催化下發(fā)生消旋反應(yīng)。其中Asp殘基*易發(fā)生消旋反應(yīng)。
β-消除：β-消除是指氨基酸殘基中β碳原子上基團(tuán)的消除。Cys、Ser、Thr、Phe、Tyr 等殘基都可通過β-消除降解。在堿性PH下易發(fā)生β-消除，溫度和金屬離子對其也有影響。
變性、吸附、聚集或沉淀變性一般都與三級結(jié)構(gòu)以及二級結(jié)構(gòu)的破壞有關(guān)。在變性狀態(tài)，多肽往往更易發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，活性難以恢復(fù)。在多肽變性過程中，首先形成中間體。通常中間體的溶解度低，易于聚集，形成聚集體，進(jìn)而形成肉眼可見的沉淀。
公司對合成的多肽提供分裝服務(wù)嗎？
合生生物生物提供部分或全部訂單，免費(fèi)分裝成小份。由于少量分裝可以避免多次反復(fù)凍融，減少容器的開蓋和閉合的次數(shù)，減少處理不當(dāng)或細(xì)菌污染的機(jī)會(huì)，讓您的多肽更加穩(wěn)定。
多肽應(yīng)該如何保存?
多肽一般是以凍干粉的形式保存，其在-20℃很穩(wěn)定，特別是冷凍干燥后并保存于-20℃干燥器中，大多數(shù)肽在此溫度下可以存放幾年不變。如果一次使用的肽量不多，*好分裝成幾個(gè)小包裝，取用更為方便。
為減少濕度的影響，在將凍干肽暴露于空氣之前，應(yīng)先將其在干燥的條件下恢復(fù)至室溫。當(dāng)無法冷凍干燥時(shí)，*好的方法是以較小的樣量存放，并盡快使用。
對于含Met,Cys或Trp的多肽，脫氧緩沖劑對其保護(hù)必不可少，因?yàn)檫@種多肽易被空氣氧化，比較好的解決方法是可以在封瓶前，慢慢通入氮?dú)饣驓鍤饬鲝亩档脱趸饔?，沒有條件的建議-80度干燥凍存。
含Gln或Asn的多肽也容易降解，所以相對于其他不含此類氨基酸的多肽，其保存期較短。
如何對合成的多肽進(jìn)行質(zhì)檢？
合生生物生物免費(fèi)提供HPLC和MS檢測結(jié)果。公司所有多肽均采用反相色譜法純化。以質(zhì)譜法測定肽的分子量來確定產(chǎn)品是否正確，MS檢測結(jié)果還可顯示大部份的主要雜質(zhì)。如果必要，還可提供肽凈含量檢測，如氨基酸分析或元素分析。這些方法可以證實(shí)多肽的氨基酸組成，他們均可作為多肽確認(rèn)的補(bǔ)充方法。所有交付的肽均達(dá)到了您要求的純度。沒有達(dá)到純度要求的那些多肽均被丟棄。當(dāng)然如果您有需要，也可以發(fā)送給您。
熒光標(biāo)記時(shí)，肽和修飾標(biāo)記的染料之間需要加一個(gè)間隔嗎？
多數(shù)染料屬于大分子量芳香族氨基酸，在多肽中引入這一類大型分子，為了避免多肽與標(biāo)簽之間發(fā)生相互作用，維持蛋白的構(gòu)象及其生物學(xué)活性，我們推薦引入一個(gè)可彎曲的間隔區(qū)，比如Ahx, Ahx是一個(gè)含有6碳分子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，可以維持熒光標(biāo)簽的穩(wěn)定性。否則，F(xiàn)ITC很容易結(jié)合多肽序列中的半胱氨酸殘基或者賴氨酸殘基。
通常情況下，生物素、FITC一類的染料既可以標(biāo)記在蛋白的氨基端也可以標(biāo)記在蛋白的羧基端。然而，為了在*短時(shí)間內(nèi)，*便捷又高效地合成多肽，***推薦客戶選擇標(biāo)記在氨基端。因?yàn)橐粋€(gè)多肽的合成往往是從羧基端開始的，這樣一來，氨基端的修飾便成為*后一個(gè)環(huán)節(jié)，不需要再進(jìn)行特別的結(jié)合作用。反之，羧基端修飾需要額外的環(huán)節(jié)，因此過程更加復(fù)雜。
為什么要進(jìn)行N端乙?；珻端酰胺化修飾？
化學(xué)合成的肽往往攜帶游離的氨基和游離的羧基。而肽的序列往往代表了母本蛋白的序列，為了與母本蛋白更為接近，肽末端往往需要封閉，即N端乙?；虲端酰胺化，這些修飾會(huì)減少多肽的總電荷，降低多肽的溶解度，也可以使肽模擬它在母本蛋白中α氨基和羧基的原始狀態(tài)。
如果需要對N端進(jìn)行乙?；揎椈?qū)端進(jìn)行酰胺化修飾，請?jiān)谙聠螘r(shí)明確。合成一旦結(jié)束，則不能再進(jìn)行修改。
能夠合成的多肽的*大長度是多少？
我們成功合成了長度為120個(gè)氨基酸的多肽。 50個(gè)氨基酸長度的多肽屬于常規(guī)合成。
更多咨詢，可訪問
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